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液相色谱法测定生物发酵产品中腺苷的含量

更新时间:2016-10-21      点击次数:2469

液相色谱法测定生物发酵产品中腺苷的含量

本方法适用于虫草、菌粉、灵芝等产品系列发酵产品

1 仪器与试剂

1.1仪器配置

等度系统

具体配置

数量

备注

LC-500高压输液泵

1

 

SPD-500紫外检测器

1

 

7725i手动进样阀

1

 

色谱工作站

1

 

C18色谱柱 250*4.6  5um

1

 

平头进样针

1

 

前处理设备

超声波脱气机

1

 

溶剂过虑装置

1

 

真空泵

1

 

溶剂过滤头

 

有机/水系

1.2试剂                                                      

腺苷对照品含量≥99.0

色谱纯甲醇水为超纯水其他为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱 C18(250 mm × 4.6 mm,5μm)

流动相:甲醇磷酸盐缓冲液(pH 6.5) = 101

流速为1.0 ml /min

检测波长为260nm

柱温为室温,进样量为20 μl

2.2 供试品溶液的制备

取拟青霉约1.0g精密称定,置于50 ml 量瓶,加入20% 甲醇定容至50 ml密塞,称定重量,超声20min,放至室温后称重,用甲醇补足减失的重量。用0. 45 μm 微孔滤膜滤过后供分析。

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