处于良好操纵状态的泵,应该能使色谱图上的基线平稳;保存时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢平稳的。
1 在日常使用过程中出现压力不稳的现象。主要原因有几点:
1.1 管路里有气泡。
1.2 输进单向阀失效所致,这也是经常遇见的。
1.3 密封圈磨损导致泄漏所造成。
2 压力不稳的排除方法如下:
2.1 排除管路里气泡的方法是:
打开排空阀,用针筒多抽几下,排出气泡。再用活动相冲洗一段时间。为了加快排出气泡,还可以关紧排空阀,堵住检测器上的背压管,使流通池的压力增加,赶出气泡(但需留意不能压力太高,以免损坏流通池)。
2.2 排除单向阀失效的方法为:
2.2.1 造成单向阀失效原因:
2.2.1.1 泵内残留活动相与宝石球粘连。如长期不使用轻易造成类似情况,所以在长期不使用的情况下,应每二周用甲醇作为活动相,开机冲洗1小时,使管路布满。
2.2.1.2 活动相内杂质或其它原因污染了单向阀。固然活动相是HPLC级的,又经过过滤,但长期使用后仍难免会产生污染。
2.2.2 判定单向阀失效的方法:
2.2.2.1 将泵接上蒸馏水作为活动相。(请勿打开UV检测器与工作站)。
2.2.2.2 打开排空阀,用30 ml的针筒抽出些活动相,确认泵中已有该活动相,然后将针筒内的液体排出,并重新接在排空阀上。
2.2.2.3 将泵设置流量为5ml/min,冲洗5min(留意:此时排空阀仍要打开,否则将冲坏色谱柱)。
2.2.2.4 冲洗完毕后,查看针筒内活动相体积是否为25ml(5×5=25),若正确,则说明该泵在低压情况下*;若不正确,则说明该泵中某一单向阀失效(一般多为输进单向阀)。
2.2.2.5 如是双泵梯度分析系统,泵压力不稳一般是其中一台压力不稳所致,可逐个分析。
2.2.3 单向阀失效处理方法:
2.2.3.1 拧下输进单向阀(一共两个)。
2.2.3.2 将2个单向阀放进有蒸馏水的超声波清洗器,清洗10分钟。
2.2.3.3 用冲洗工具冲洗二、三次。冲的时候留意要用手按住单向阀前头,防止把阀内零件冲失。
2.2.3.4 完毕后,将输进单向阀装回原位即可(单向阀是高压部件,须拧紧,防止泄漏)。
若梯度系统两个泵在低压状态下流量都正确,则建议分别将两泵连接上色谱柱进行高压测试。