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了解液相色谱:原理、设备和应用

更新时间:2023-04-14      点击次数:2082


了解液相色谱:原理、设备和应用

了解液相色谱:原理、设备和应用

液相色谱(Liquid Chromatography,简称LC)是一种重要的分离和分析技术,广泛应用于化学、生物、制药和环境等领域。液相色谱中,泵是其中的核心部件之一,用于驱动溶液通过色谱柱进行分离。根据泵的种类不同,液相色谱泵可以分为单元泵、二元泵和四元泵。

单元泵是简单的泵,由一个泵组件和一个阻尼器组成。泵组件内含有两个相同的活塞泵单元,每个泵单元包括一个滚珠丝杠驱动器和一个带有蓝宝石活塞的泵头。微处理器控制泵的流速在1 μL-10 mL/min范围内。液体从流动相瓶流到入口主动阀,第一个泵单元的入口和入口主动阀相连。单元泵是经常用到的泵之一,因其成本低、易于操作和维护,得到了广泛的应用。

二元泵包含两个相同的泵,这两个泵集成在一个腔体内,通过高压混合来产生梯度。每个通道由一个泵组件组成,包括泵驱动器、泵头、主动输入阀和输出阀。两个通道在一个低容积混合腔中连接,混合腔通过毛细管连接到缓冲单元(阻尼器)和混合器上。带有PTFE过滤芯的冲洗阀装在泵的出口处,便于向泵头灌注流体。

四元泵包括一个真空脱气机和一个四通道梯度泵。四通道的梯度泵包括一个高速配量阀和一个泵组件。在使用四元泵是需要注意的是:当盐溶液和有机溶剂混合时,盐溶液可能与有机溶剂混溶,而不会出现沉淀。但是在梯度阀的混合点、在两种溶剂的边界处,可能出现微量沉淀。重力作用使盐颗粒沉淀下来。通常,阀的A通道用于含水/盐溶液,而泵的B通道用于有机溶剂。如果使用的是这样的配置,盐将落回到盐溶液中并被溶解。当泵使用的不同配置(例如,D-盐溶液,A-有机溶剂)时,盐可能会落到有机溶剂的端口中,从而导致性能问题。

液相色谱中的柱子也是至关重要的部件之一。液相色谱柱是通过特定的填充物将样品中的化合物分离开来的。填充物通常是非极性或极性材料,具有不同的分子大小和化学性质。液相色谱柱的选择和优化是分析方法开发中至关重要的步骤。

在液相色谱中,流动相的选择也是非常重要的。流动相是溶解样品的溶剂,它在柱子中流动并将样品分离开来。流动相可以是单一溶剂,也可以是多种溶剂的混合物。混合物中不同溶剂的比例可以调整,以达到不同的分离效果。流动相的选择和优化是影响液相色谱分离效果和灵敏度的重要因素之一。

除了液相色谱,还有气相色谱(GC)和质谱(MS)等其他色谱技术。GC是将样品分子通过在固定相(通常是固体填充柱)和气相之间传输来分离和分析的技术。MS是一种使用磁场分离和分析分子的技术,通常与色谱技术结合使用。液相色谱和其他色谱技术结合使用可以提高分析效果和检测灵敏度。

液相色谱是一种广泛应用于生命科学、环境科学和工业生产等领域的分析技术。对于液相色谱的实验操作,理解和掌握液相色谱系统的核心部件和优化方法是非常重要的。同时,深入了解液相色谱柱、流动相和其他相关技术也可以提高分析的效果和灵敏度。


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