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如何正确地检测和保存氨基柱:方法与注意事项

更新时间:2023-04-24      点击次数:833

氨基柱的柱效检测及保存方法

氨基柱是以硅胶作为基质载体,键合氨基的色谱柱。氨基柱通常用于分析糖类化合物,所使用的流动相通常是甲醇、乙腈和缓冲盐溶液,其中乙腈的使用相对较多。

使用氨基柱时易受水解影响,因此需要注意以下事项:

  1. pH值越低,水解发生的危险性越大,因此应严格控制pH范围;

  2. 流动相中水的比例越高,水解发生的危险性越大。

因此,在使用后以及长时间放置该柱前,必须进行必要的清洗,并将氨基柱保存于纯的有机溶剂中以进行保养。

氨基柱的柱效检测:

柱效检测是判断一个用户的经验是否足够的指标之一,用户可以习惯配制一些柱效检测标准溶液。在柱效检测方面,我们提供一个通用的方法,可用于检测硅胶柱和氰基柱。

流动相:10% 乙酸乙酯 + 90% 正己烷,流速为1.0。

标准溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯。

检测波长为254nm。

此方法特别适用于刚购买氨基柱时进行检测,如有问题,可及时与氨基柱厂家沟通。此外,建议在柱子准备放置相当长一段时间之前,进行充分清洗后进行检测,以作为记录留存。在平常的使用过程中,如果分析物是重复的,可以根据分析物的分离情况判断氨基柱效;但是,如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费时间和劳力的过程。特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件下使用时,请注意流动相的换相过渡问题。

氨基柱冲洗:

在使用正相条件下的氨基柱时,可按硅胶柱的清洗方法进行清洗;在使用反相条件下的氨基柱时,则应按照C18柱的清洗方法进行清洗。

氨基柱的保存:

  1. 在正相条件下,使用氨基柱后,将柱子清洗干净,并用正己烷-乙腈(比例为99:1)保存。

  2. 在反相条件下,如短期不使用,可用甲醇或乙腈进行保存。若长期不使用,则需要将甲醇逐步用异丙醇和CHCl3置换,最后用正己烷保存。


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