wook500液相色谱柱技术包括填料技术和装柱技术,填料技术自不待言,填料的好坏对色谱柱分离性能和选择性有决定性影响。装柱技术也没有想象中的这么简单,不同固定相、不同粒径、不同柱管内径和长度,装柱工艺都有所不同,要装出紧密、稳定、均一的柱床,更多是一门艺术,需要经验积累。
wook500液相色谱柱尺寸的选择
较长的色谱柱组分保留较强,运行时间较长,柱效更高,分离度效果更好。在实际工作中应综合衡量运行时间和柱效,选择长度适宜的色谱柱。例如含量测定、溶出检测对于分离的要求较低,可选用较短的色谱柱,减少运行时间;有关物质一般选择较长的色谱柱,提高分离效果。
内径小的色谱柱灵敏度较高,峰型更窄,但是载样量较小。如果载样量满足要求,需要更高更尖锐的峰提高灵敏度,可以选择更小内径。但是如果进样量超过了柱载样量,色谱峰将极大变宽。所以应在灵敏度和载样量之间综合衡量。
粒径小的色谱柱分离度较好,压力更大。如果5μm粒径的色谱柱分离度稍有不足,则同型号3μm色谱柱的分离度一般会提供令人满意的选择性。
如果选择较小尺寸的色谱柱,应衡量柱外死体积对柱效的影响,柱外死体积包括连接管线、进样体积、色谱柱接头与色谱柱连接处的空隙等。所以一般超液相使用的色谱柱不适用于常规液相仪。小规格色谱柱使用同一品牌的仪器,减少连接处空隙引入的死体积。