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高效液相色谱法测定生物发酵产品中成分腺苷的含量

更新时间:2021-06-23      点击次数:1335

 

高效液相色谱法测定生物发酵产品中成分腺苷的含量

 

本方法适用于虫草、菌粉、灵芝等产品系列发酵产品

1 仪器与试剂

1.1仪器

高效液相色谱仪( LC-500A) SPD-500紫外检测器

N2000色谱工作站;

超声波清洗器,十万分之一天平;

 

1.2试剂                                          

腺苷对照品含量≥99.0

色谱纯甲醇,水为超纯水其他为分析纯。

 

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱 C18( 150 mm × 4.6 mm5μm)

流动相:甲醇:磷酸盐缓冲液(pH 6.5 = 101

流速为1.0 ml /min

检测波长为260nm;柱温为室温;进样量为10 μl

 

2.2 供试品溶液的制备

取拟青霉约1.0g,精密称定,置于50 ml 量瓶,加入20% 甲醇定容至50 ml,密塞,称定重量,超声20min,放至室温后称重,用甲醇补足减失的重量。用0. 45 μm 微孔滤膜滤过后供分析。


                                                                      腺苷标准品谱图


               拟青霉样品谱图

 


                                                        头孢菌样品谱图

3. 液相色谱仪器配置

Pos

Product Number

Qty

1

WK500-0102-002   LC-500A高压输液泵

1

2

WK500-1415-004   仪器启动工具包

1

3

WK500-0101-001   SPD-500可变波长紫外检测器

1

4

WK500-0413-003   7725i手动进样阀 

1

5

WK500-0401-027   C18 250*4.6

1

6

WK500-1106-002   溶剂托盘

1

7

WK500-0301-001   色谱工作软件 

1

8

样品前处理包

1

(超声波1台,真空泵1台,溶剂过滤器1套,

滤器、滤膜各2包)

 

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